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Thiazolylblau - Tetrazoliumbromid BioChemica, (3-(4,5-Dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazoliumbromid, MTT, C18H16BrN5S), M= 414,33 g/mol CAS-Nr.: 298-93-1, HS-Nr.: 29341000, EG-Nr.: 2060695 Lagerung: 2 bis 8°C lichtgeschützt unter Argon Eigenschaften: - Schmelzpunkt.....190 bis 210°C
Spezifikation: - Gehalt (TLC) min. 98%
- ?max. .....239 bis 247 nm
- Löslichkeit (5%, MeOH).....klar
Hinweis: Mitochondriale Dehydrogenasen lebender Zellen sind in der Lage das MTT-Tetrazoliumsalz durch Spaltung des Tetrazoliumringes in MTT-Formazan umzuwandeln. Die Spaltung des Farbstoffes ist direkt proportional zur Zellzahl, steigt aber nicht-linear mit der Funktion der Zeit. Durch MTT kann die Zellaktivierung unabhängig von der Proliferation gemessen werden. Verschiedene Autoren hatten technische Probleme, die zu großen Abweichungen geführt haben. Durch systematische Untersuchung der verschiedenen Parameter konnten diese Fehlerquellen beseitigt werden. Der richtige pH-Wert (pH < 5) und die Zusammensetzung des Extraktionspuffers hat sich als bedeutend erwiesen. Durch den sauren pH-Wert konnte sich das gebildete Formazan vollständig lösen. Als Stammlösung wurden 5 mg/ml MTT in PBS gelöst und zur Entfernung unlöslichen Materials filtriert. Die Lösung wird bei +4°C lichtgeschützt gelagert und ist ca. einen Monat haltbar. MTT ist für die Zellen toxisch. Mit zunehmender Inkubationsdauer sterben die Zellen ab. Deshalb wurde auch die Arbeitskonzentration auf 1 mg/ml reduziert.
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