- CAS: 7365-45-9
- Formel: C8H18N2O4S
- Synonyme: 4-(2-Hydroxyethyl)-piperazin-1-ethansulfonsäure, 4-(2-Hydroxyethyl)-piperazin-N'-2-ethansulfonsäure
- Molekulargewicht: 238.31 g/mol
- Lagerung: unter 25°C
- Retestperiode: 48 Monate
- Gehalt (titr.): >= 99.5 %
- pH (1% in Wasser, 20°C): 4.7-6
- Schwermetalle (als Pb): <= 0.001 %
- Wasser: <= 0.5 %
- Chlorid (Cl): <= 0.05 %
- Sulfat (SO4): <= 0.05 %
- Absorption (1 M in Wasser) 260nm: <= 0.1
- Absorption (1 M in Wasser) 280nm: <= 0.05
HEPES oder 4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinethansulfonsäure ist ein zwitterionischer organischer Puffer mit einem pKa-Wert von 7,3 (bei 37 °C). Seine Pufferkapazität ist daher im pH-Bereich zwischen 6,8 und 7,8 am größten. HEPES ist leicht wasserlöslich (ca. 40 g/100 ml), ungiftig, membranundurchlässig und (bio)chemisch stabil. HEPES beeinträchtigt weder biologische Prozesse noch die Membranintegrität (Penetration, Solubilisierung, Oberflächenadsorption etc.). Seine Absorption im UV- und sichtbaren Bereich (> 260 nm) ist extrem gering, und es zeigt keine Tendenz zur Komplexierung von Metallionen, was seine Eignung für biochemische Assays unterstreicht. HEPES ist daher ein wichtiger biologischer Puffer, der häufig zur pH-Wert-Stabilisierung in Enzymreaktionen und in Medien für die Zell- und Gewebekultur eingesetzt wird. Befürchtungen, HEPES könnte als Nährstoffquelle für aerobe Bakterien dienen, haben sich als unbegründet erwiesen.
Anwendung: HEPES findet breite Anwendung in der Zell- und Gewebekultur, bei der Proteinreinigung, -lagerung (zum Schutz vor gefrierbedingten pH-Wert-Änderungen) und -extraktion, in der Elektrophorese, Immunpräzipitation, Chromatographie, für Enzymassays, Proteinmarkierung und vielen anderen biologischen, biochemischen und mikrobiologischen Verfahren. Insbesondere bei der Verwendung metallionenhaltiger Lösungen wird die Verwendung von HEPES als nicht-koordinierendem Puffer empfohlen.
Achtung: HEPES beeinträchtigt den Folin-Ciocalteu- (Lowry-) Proteinbestimmungstest. Der BCA-Test und der Bradford-Test werden hingegen nicht beeinflusst.
HEPES ist ein bewährter pH-Stabilisator in Zell- und Gewebekulturmedien – zusammen mit oder anstelle von Bicarbonat. Die Zugabe von HEPES wird empfohlen, um eine stabile Pufferung des Zellkulturmediums bei einem pH-Wert von 7,2 bis 7,6 zu gewährleisten.Der HEPES-Gehalt in Zellkulturmedien kann zwischen 10 mM und 25 mM variieren, wobei 25 mM die gebräuchlichste Konzentration ist.Achtung: Bei Konzentrationen über 100 mM kann es zu Zelltoxizität kommen!
Als Stammlösung wird 1 M HEPES in Wasser hergestellt. Der gewünschte pH-Wert wird mit NaOH eingestellt. HEPES-Lösungen können durch Autoklavieren oder Filtration sterilisiert werden.
Lagerung und Stabilität: HEPES-Pulver und sterile Lösungen bei Raumtemperatur lagern. Wässrige HEPES-Lösungen sind hitzebeständig, neigen jedoch bei Lichteinwirkung zur Bildung von Wasserstoffperoxid. Um Oxidation zu verhindern, sollten HEPES-haltige Lösungen daher lichtgeschützt aufbewahrt werden.
- Dieser Stoff erfüllt nicht die Kriterien für die Einstufung gemäß der Verordnung Nr. 1272/2008/EG
- Generelle Lüftung
- Schutzbrille/Gesichtsschutz tragen!
- Schutzhandschuhe tragen! NBR: Acrylnitril-Butadien-Kautschuk min. 0.11mm
- Geruch: charakteristisch
- Schmelzpunkt/Gefrierpunkt: 174 – 180 °C
- Entzündbarkeit dieses Material ist brennbar, aber nicht leicht entzündbar
- Wasserlöslichkeit: 20 g/l bei 30 °C
- UN-Nummer oder ID-Nummer: unterliegt nicht den Transportvorschriften
- Wassergefährdungsklasse: 1
