RNase T, (Ribonuklease T1), M= ~11085 g/molCAS-Nr.: 9026-12-4, HS-Nr.: 35079090, EG-Nr.: 2328091Lagerung: 2 bis 8°C, LGK: 10-13, Entsorgung: 4, S: 24/25Spezifikation:Aktivität/mg Protein min. 50000 UAktivität/ml ca.23.500 UHinweis:Ribonuklease T1 ist eine Endoribonuklease, die spezifisch RNA zwischen dem 3'-Phosphat von Guanin oder Inosin (Guanosin-3'-phosphat, Inosin-3'-phosphat) zum 5'-OH des benachbarten Nukleotides spaltet. Sie wird in Klonierungen und Sequenzierungen, Entfernung nichthybridisierter Regionen von RNA in RNA:RNA oder DNA:RNA-Hybriden (InSitu-Hybridisierung zellulärer RNA: Ref. 1 Suppl. 13 Seite 14.3.10), Strukturuntersuchungen, Analyse von RNAs im RNase-Protection Assay in Verbindung mit RNase A, Herstellung von 2',3'-cyclischen Nukleosidphosphaten, zur Oligosynthese und zur Beseitigung von RNA aus DNA-Präparationen eingesetzt. Das Enzym wird durch Ionen, wie Ag+, Zn2+, Cu2+ und Hg2+ in Konzentrationen von 10-3 M gehemmt. Histidin und EDTA stimulieren RNase T1, wahrscheinlich durch Komplexieren störender Ionen. RNase T1 ist ein relativ stabiles Enzym mit einem pH-Optimum von 7,5, das auch kurzfristiges Erhitzen auf 100°C (10 Minuten, pH 6) übersteht. Dies sollte man berücksichtigen, falls man das Enzym im Reaktionsansatz inaktivieren will. Im alkalischen pH-Bereich (>pH 9) nimmt die Stabilität ab, während RNase T1 im sauren pH-Bereich relativ stabil ist. Die empfohlene Arbeitskonzentration liegt bei 2 ?g/ml oder 10 U/ml (in Hybridisierungsexperimenten z. B. Ref. 2 Seite 17.29). Einheiten-Definition: Eine Einheit bewirkt einen Anstieg der Absorption von 1,0 bei 260 nm bei 37°C und pH 7,5. Stabilität: Als Suspension in 2,8 M Ammoniumsulfat beträgt die Stabilität bei +4°C mehr als 12-18 Monate (neutraler pH-Bereich) und in anderen Lösungen mehrere Wochen (neutraler pH-Bereich).aus Rinderpankreas salzfrei, gefriergetrocknetLösung in 2,8 M Ammoniumsulfat

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