Mithramycin A, (C52H76O24), M= 1085,17 g/molCAS-Nr.: 18378-89-7, HS-Nr.: 29419000Lagerung: 2 bis 8°C lichtgeschützt, LGK: 10-13Eigenschaften:Schmelzpunkt.....ca. 183°CSpezifikation:Gehalt (HPLC) min. 85%Hinweis:Mithramycin ist ein fluoreszierendes Antibiotikum und wurde aus Streptomyces plicatus isoliert. Es weist eine hohe Spezifität für doppelsträngige DNA, nicht aber für RNA auf. Als Magnesium-Komplex bindet es mit hoher Affinität an die 2-Aminogruppe von Guanin (4). Die Bindung ist nicht interkalierend und nicht kovalent. Das Antibiotikum findet als Farbstoff Anwendung in der 'Flow Cytometry', DNA-Quantifizierung oder Mikroskopie (1). Die optimalen Bedingungen für Ethanol-fixierte Zellen sind ein pH-Bereich zwischen 5,5 und 8,5, eine Ionenstärke von 150 - 400 mM NaCl, einer Mithramycin-Konzentration von 5-100 ?g/ml und einer Magnesium Konzentration von 15 - 30 mM (1). Durch seine Fähigkeit spezifisch an G-C - Paare der DNA zu binden, ist Mithramycin in der Lage die Transkription von Genen mit 'G/C-Boxen' in der Promotorsequenz zu hemmen. Dazu gehören zum Beispiel das Dihydrofolat-Reduktase-Gen und das c-myc-Gen (2, 3). Als Ursache wird die Hemmung der Bindung des Transkriptionsfaktors Sp1 an die 'G/C-Boxen' angenommen. Stabilität: Mithramycin ist in wässrigen Lösungen bis zu 1 mg/ml löslich. Wenn es sich nicht löst, kann es in DMSO gelöst und die Stammlösung mit wässrigen Lösungen verdünnt werden. Eine Lösung (z. B. Tris · HCl, pH 7,2) ist lichtgeschützt bei +4°C mindestens einen Monat haltbar (bezogen auf die Fähigkeit DNA zu färben, Ref. 1).Literatur:(1) Crissman H.A. & Tobey, R.A. (1990) Methods Cell Biol. 33, 97-103 / Spezifische Färbung von DNA mit fluoreszierenden Antibiotika.(2) Blume, S.W. et al. (1991) J. Clin. Invest. 88, 1613-1621 / Mithramycin hemmt die SP1-Bindung und selektiv die transkriptionelle Aktivität des Dihydrofolat-Reduktase-Genes in vitro und in vivo.(3) Hardenbol, P. & Van Dyke, M.W. (1992) Biochem. Biophys. Res. Com. 185, 553-558 / Mithramycin hemmt die c-myc-Transkription in vitro.(4) Aich, P. & Dasgupta, D. (1995) Biochemistry 34, 1376-1385 / Rolle von Magnesium in der Mithramycin-DNA - Interaktion.

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