E-64, (N-(trans-Epoxysuccinyl)-L-leucin-4-guanidinobutylamid, trans-Epoxysuccinyl-L-leucylamido-(4-guanidino)butan, C15H27N5O5), M= 357,40 g/mol
CAS-Nr.: 66701-25-5, HS-Nr.: 29419000
Lagerung: -20°C unter Argon
Spezifikation:
- Gehalt (TLC) min. 99%
- a20°C/D, 1%, 0,1 M HCI.....+23° bis +26°
- Löslichkeit (2%, H2O).....klar, farblos
Hinweis:
E-64 ist ein irreversibler Inhibitor verschiedener Cystein-Proteasen (Papain, Bromelain, Ficin, Cathepsin B, H und L, Tumor-Cathepsin, Calpain, V-CATH aus Autographa californica M nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) und Streptococcus-Protease). Alle Enzyme werden durch eine Konzentration von 10-30 ?M innerhalb von 30 Minuten voll- ständig inhibiert. E-64 ist stabil gegen reduzierende Agentien. Stammlösungen werden in Konzentrationen zwischen 1 - 10 mM in DMSO hergestellt und sind für einige Tage bei +4°C stabil. Alternativ kann die Stammlösung auch in 50 % Ethanol hergestellt werden. Aliquots können bei -20°C für ca. 1 Monat gelagert werden. E-64 und andere Protease-Inhibitoren (z. B. Diisopropylfluorphosphat und PMSF) sind in der Lage den programmierten Zelltod, der durch Aktivierung des T-Zellrezeptors bei verschiedenen Zelllinen des Immunsystems ausgelöst wird, zu hemmen. Dabei wird nicht die Signaltransduktion blockiert. Die Effekte von Dexamethason, das antago- nistisch zum T-Zellrezeptor den programmierten Zelltod auslöst, werden sogar verstärkt. Bei der Expression von Proteinen im Baculovirus-System mit einem funktionellen v-cath-Gen, wird häufig eine proteolytische Aktivität beobachtet, die die Qualität der expremierten Proteine stark beeinträchtigt. Durch Zugabe von E-64 in allen Reaktionsschritten kann dies weitgehend verhindert werden.
