N,N'-Bisacryloylcystamin BioChemica, (BAC, 2,2'-Bisacrylamino-diethyldisulfid, Cross-linker, C10H16N2O2S2), M= 260,38 g/mol
CAS-Nr.: 60984-57-8, HS-Nr.: 29309070, EG-Nr.: 2625468
Lagerung: 2 bis 8°C, Entsorgung: 3, R: 36/37/38, S: 26-36, reizend
Eigenschaften:
- Schmelzpunkt.....121 bis 125°C
Spezifikation:
- Gehalt (TLC) min. 99%
- Sulfat max. 0,02%
- Ca max. 0,1%
- Mg max. 0,005%
- Na max. 0,2%
- Pb max. 0,0005%
Hinweis:
Acrylamid-Gele, die mit Disulfid-Brücken quervernetzt sind, haben den Vorteil, dass sie durch Zugabe von Disulfid-reduzierenden Reagenzien (z. B. ß-Mercaptoethanol, DTT) aufgelöst werden können. Auf diese Weise können RNA- und DNA-Moleküle einfach isoliert werden. N,N'-Bisacryloylcystamin (BAC) ist ein entsprechender Crosslinker. Mit ihm können Acrylamid : BAC - Mischgele zwischen 3,5 % und 12,5 % hergestellt werden. Das Mischungsverhältnis liegt zwischen 12 : 1 und 19,1 : 0,9. Bei der ursprünglichen Entwicklung dieser Gele hat sich gezeigt, dass unter den Konditionen, unter denen Acrylamid : Bis - Mischgele hergestellt werden, Thiyl-Radikale entstehen, die das Gel unauflösbar machen. Es haben sich folgende Polymerisationsbedingungen für die Auftrennung von DNA-Fragmenten als optimal erwiesen: Ein Mischungverhältnis von 19,1 : 0,9 (Acrylamid : BAC), 0,1 % Ammoniumpersulfat, 0,25 % TEMED, 1XTBE, polymerisieren bei 41°C für 1 Stunde (Achtung: Bei den erhöhten Temperaturen läuft die Polymerisation sehr schnell ab. Der Kamm muss innerhalb von ca. 30-40 Sekunden eingesteckt sein.) Zum Auflösen werden 3 - 5 g des polymerisierten Gels in 5 ml TBE mit 0,1 ml ß-Mercaptoethanol oder 140 mM DTT inkubiert. Das Gel löst sich in weniger als 30 Minuten auf. Der pH von 8,3 ist dafür optimal. RNA-Gele lassen sich in Formamid herstellen. BAC löst sich in Wasser bei 50 - 60°C. Eine 1%ige Stammlösung von BAC (oder mit Acrylamid) kann bei Raumtemperatur mindestens 2 Monate gelagert werden.
