Nonidet® P40 BioChemica, (Nonylphenylpolyethylenglycol, NP40 Standardgemisch von 15 Homologen)
CAS-Nr.: 68412-54-4, HS-Nr.: 34021300
Lagerung: RT, R: 22-41-51/53, S: 26-39-46-61, gesundheitsschädlich, umweltgefährlich, Klasse / PG: 9 / III, UN 3082
Spezifikation:
- Gehalt min. 99%
- pH (5 %, H2O).....5,5 bis 7,0
- Schwermetalle max. 0,005%
- Chlorid max. 0,05%
- Sulfat max. 0,01%
Hinweis:
Viele lösliche Kernproteine oder cytoplasmatische Proteine können mit dem nichtionischen Detergens Nonidet® P40 (NP40) aus eukaryontischen Zellen herausgelöst werden. Einer der am weitesten verbreiteten Lysepuffer ist der RIPA-Puffer mit der Zusammensetzung 50 mM Tris · HCl (pH 7,5), 150 mM NaCl, 1 % NP40, 0,5 % Natriumdeoxycholat und 0,1 % SDS. Mitunter werden die Konzentrationen der einzelnen Komponenten oder der pH-Wert variiert, da die genauen Pufferbedingungen sehr stark von dem zu reinigenden Protein abhängen. Auch werden dem Puffer meistens unterschiedliche Protease- und Phosphatase-Inhibitorcocktails zugesetzt. Wenn Proteine aus NP40-haltigen Lysepuffern in band shifts (electrophoretic mobility shift assays) eingesetzt werden sollen, ist zu beachten, dass das Detergens unterschiedliche Effekte (Hemmung / Verstärkung) auf die Bindung Protein-DNA haben kann. Die Zugabe von 0,5 % Nonidet® P40 in die Sequenzierungsreaktion von linearisierter oder supercoiled Plasmid-DNA erhöht die Qualität des Ergebnisses (weniger Artefakte) und der Schritt der alkalischen Denaturierung kann weggelassen werden.
