Formamid BioChemica, (Ameisensäureamid, CH3NO), M= 45,04 g/mol
CAS-Nr.: 75-12-7, HS-Nr.: 29241000, EG-Nr.: 2008420
Lagerung: RT, LGK: 6.1 A, Entsorgung: 1, R: 61, S: 53-24/25-37-45 / WGK: 1, fortpflanzungsgefährdend, Giftklasse (CH): 3
Eigenschaften:
- Dichte (d 20°/4°).....1,13
- n 20°/D.....1,4472
- Schmelzpunkt.....2°C
- Siedebereich.....210°C
Spezifikation:
- Gehalt (aus N) min. 99,5%
- Schwermetalle (als Pb) max. 0,0005%
- Wasser max. 0,1%
- Chlorid max. 0,0001%
A (1 cm/10 M in HPLC-Wasser):
- 260 nm.....max. 0,4
- 280 nm.....max. 0,1
Hinweis:
RNA oder DNA mit einer Kettenlänge >150 - 200 Basenpaare denaturiert komplett bei Raumtemperatur in 98 % Formamid, nicht jedoch in 7 M Harnstoff. Auf diese Weise ist die Größe der DNA-/RNA-Einzelstränge genau bestimmbar, da unter diesen Bedingungen die Basenzusammensetzung und Sekundärstruktur ohne Bedeutung sind. Das Polyacrylamidgel muss 98 % Formamid (deionisiert und wasserfrei) enthalten. Dabei wird Acrylamid und Bisacrylamid im Formamid gelöst. Entsprechend werden auch Formamid-haltige Ladepuffer (Ladepuffer VI Sequenziergele oder Ladepuffer VII denaturierende Agarose-Gele) verwendet. Die Stabilität von RNA ist in Formamid wesentlich höher als in DEPC-behandeltem Wasser. Die Langzeit-Lagerung von über einem Jahr kann bei -20°C erfolgen, statt -70°C bei Lagerung in DEPC-behandeltem Wasser. In Blot-Experimenten werden zunehmend auch nicht-Formamid-enthaltende Puffer entwickelt, wobei bestimmte Vorteile des Formamids durch andere Puffer nicht ausgeglichen werden können. Hybridisierung von Nukleinsäuren in Formamid-haltigen Puffern führt zu sehr spezifischen Hybriden und damit zu weniger Waschschritten.
