Dieses Produkt wird aus Rinderpankreas hergestellt und als salzfreies, gefriergetrocknetes Pulver geliefert, das durch Chromatographie aufbereitet wird.
- CAS: 9003-98-9
- Synonyme: Desoxyribonuklease I, [E.C. 3.1.21.1]
- Molekulargewicht: ~31000 g/mo
- Lagerung: -20°C
- Retestperiode: 48 Monate
- Aktivität (Kunitz): >= 3000 U/mg (revised)*
- *Die Enzymmenge, die nach der Methode von Kunitz bei 25 °C einen Anstieg der Absorption bei 260 nm um 0,001 pro Minute bewirkt.
DNase I (Desoxyribonuklease I) spaltet einzel- und doppelsträngige DNA (einschließlich Chromatin) bei neutralem pH-Wert (Optimum: pH 7,8) und erzeugt dabei Polynukleotide mit einem 5'-Phosphat und einer freien Hydroxylgruppe in 3'-Position. Die Aktivität und Spezifität (Einzelstrang vs. Doppelstrang) der DNase I wird durch die umgebenden Ionen bestimmt.1 Maximale Aktivierung erfordert die Anwesenheit von Mg2+- und Ca2+-Ionen. Magnesiumionen führen hauptsächlich zur Bildung von Einzelstrangbrüchen, während Mn2+-Ionen Doppelstrangbrüche verursachen. DNase I wird durch Chelatoren wie Citrat, EDTA und SDS oder ?-Mercaptoethanol gehemmt.
DNase I wird aus Rinderpankreas extrahiert und mittels mehrfacher Fällung, Fraktionierung, Chromatographie und Filtration gereinigt. Dank der hochoptimierten Reinigungsprozesse wird ein Produkt von höchster Qualität, Stabilität und Chargenkonsistenz gewährleistet. DNase I wird als salzfreies, gefriergetrocknetes Pulver geliefert. Lagerung bei -20 °C
Anwendung: DNase I wird zur DNA-Spaltung bei der Isolierung und Reinigung von RNA verwendet. DNase wird in einer Konzentration von 2 mg/ml in 0,15 M Natriumchlorid oder Reaktionspuffer (z. B. 50 mM Tris?HCl pH 7,5, 50 ?g/ml BSA, 10 mM MgCl? oder 10 mM MnCl?) gelöst. Hitzeinaktivierung von DNase I: 10 Minuten auf 99 °C erhitzen. Herstellung von RNase-freier DNase I (gemäß Ref. 2, Seite 3.12.6, Supplement 8): Da DNase I Spuren von RNasen enthalten kann, wird empfohlen, DNase I vor der Verwendung nach folgendem Protokoll zu behandeln: 1 mg/ml DNase I wird in 0,1 M Iodessigsäure und 0,15 M Natriumacetat bei einem pH-Wert von 5,3 gelöst. Die Lösung 40 Minuten lang auf 55 °C erhitzen und anschließend abkühlen lassen. 1 M CaCl? bis zu einer Endkonzentration von 5 mM zugeben. In kleinen Portionen bei -20 °C lagern.
- Dieser Stoff erfüllt nicht die Kriterien für die Einstufung gemäß der Verordnung Nr. 1272/2008/EG
- EG-Nr.: 232-667-0
- EG-Nr. 232-667-0
- Schutzhandschuhe tragen, NBR: Acrylnitril-Butadien-Kautschuk, min. 0.11mm Wassergefährdungsklasse: 1
- UN-Nummer oder ID-Nummer unterliegt nicht den Transportvorschriften
