- CAS: 6578-06-9
- Synonyme: 5-Bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate p-Toluidine salt, X-Phos p-Toluidine salt, X-Phos-p
- Formel: C8H6brClNO4P x C7H9N
- Molekulargewicht: 433.64 g/mol
- Lagerung: -20°C
- Retestperiode: 48 Monate
- Aussehen: weißes bis hellbraunes Pulver
- Gehalt: min 98%
- DNasen/RNasen/Proteasen: nicht nachweisbar
- Identität: besteht Test
- Wasser (KF): max 3%
Das künstliche Substrat BCIP dient dem Nachweis und der Visualisierung der alkalischen Phosphatase in verschiedenen biochemischen, molekularbiologischen und immunhistochemischen Methoden. Die Dephosphorylierung von BCIP in Gegenwart von Luftsauerstoff führt zur Bildung des tiefblauen Farbstoffs 5,5?-Dibrom-4,4?-dichlorindigo, der sich leicht auf Gewebe und Blottingmembranen nachweisen lässt. Da BCIP selbst nahezu unlöslich ist, wird 5-Brom-4-chlor-3-indolylphosphat üblicherweise als p-Toluidinsalz (wie in Artikel 1265 beschrieben, löslich in DMF mit 50 mg/ml) oder gelegentlich als Dinatriumsalz (löslich in Wasser mit 20 mg/ml) verwendet.
Anwendung: BCIP dient als chromogenes Substrat in Northern-, Southern- und Western-Blotting-Analysen sowie in der In-situ-Hybridisierung und Immunhistochemie. BCIP (in Kombination mit dem Redoxfarbstoff NBT) ermöglicht den sensitiven und zuverlässigen Nachweis der alkalischen Phosphatase, die als selektiver Marker für spezifische Proteine ??oder andere Zielstrukturen verwendet wird. Die Antikörper-gekoppelte alkalische Phosphatase katalysiert die Dephosphorylierung von BCIP zu 5-Brom-4-chlorindolyl, welches an der Luft zu einem blauen Indigofarbstoff dimerisiert. Diese Reaktion wird durch NBT verstärkt und beschleunigt, das dabei selbst zu einem blauen Diformazanfarbstoff reduziert wird. Es entsteht ein unlöslicher, violetter Niederschlag, der leicht auf Membranen oder Gewebeschnitten nachgewiesen werden kann.
Anwendungshinweis zur alkalischen Phosphatase-Detektion mit BCIP-p-Toluidinsalz und NBT im Immunoblot, Vorgehensweise:
Herstellung der frischen Substratlösung:
Sicherheitshinweise:
- Dieser Stoff erfüllt nicht die Kriterien für die Einstufung gemäß der Verordnung Nr. 1272/2008/EG
- EG-Nr.: 229-506-1
- UN-Nummer oder ID-Nummer unterliegt nicht den Transportvorschriften
- Wassergefährdungsklasse : 1
