• Medium B
• Tryptone Soya Agar
• TSA

Medium für die Kultivierung und Versorgung zahlreicher Mikroorganismen

Spezifikation/Zusammensetzung:

• Soja mit Papain verdaut: 5,0
• Pankreatischer Verdau von Casein: 15,0
• Natriumchlorid: 5,0
• Agar: 15,0
• pH: 7,3 ± 0,2

Daten:

• Lagerung: Kühl und trocken lagern
• WGK: 1
• Mastername: Trypton-Soja-Agar
• Synonym lang: TSA
• HS: 38210000

Weitere Informationen:

• Anwendungen: nichtselektive Aufzählung
• Kategorien: Wasser Klinisch Lebensmittel Kosmetik
• Branche: Pharma Veterinär Kosmetik Klinisch Lebensmittel
• Vorschriften: USP ISO 11133 ISO 11930 ISO 18415 ISO 18416
• Europäisches Arzneibuch ISO 21149 ISO 21150 ISO 22717 ISO 22718 ISO 9308

Präparation:

• Suspendieren Sie 40g des Mediums in einem Liter destilliertem Wasser. Gut mischen und durch Erhitzen unter häufigem Rühren auflösen. Eine Minute kochen lassen, bis sich alles vollständig aufgelöst hat
• In geeignete Behälter geben und im Autoklaven 15 Minuten bei 121 ° C sterilisieren. Große Mengen erfordern möglicherweise eine längere Sterilisationszeit, die Temperatur sollte jedoch nicht erhöht werden
• Um Blutplatten für Hämolysestudien vorzubereiten, geben Sie 5 bis 10% defibriniertes steriles Blut in das sterile Medium, das zuvor auf 45 ° C abgekühlt wurde. Achten Sie beim Hinzufügen des Blutes zum Kühlmedium darauf, dass sich keine Blasen bilden, und drehen Sie den Kolben oder die Flasche langsam, um eine homogene Lösung zu erhalten

Verwendung

• Trypticasein-Soja-Agar (TSA) ist ein Allzweckmedium, das sehr reich an Nährstoffen ist, zur allgemeinen Verwendung in mikrobiologischen Labors und zur Kultivierung und Isolierung anspruchsvoller oder nicht anspruchsvoller Mikroorganismen oder zur Aufrechterhaltung der Stammkultur. Es unterstützt das reichliche Wachstum anspruchsvoller Organismen wie Pneumokokken, Streptokokken, Neisseria usw. aus klinischen Proben. Dieses Medium enthält zwei Peptonen als reichhaltige Stickstoffquellen, die durch enzymatische Hydrolyse von Kasein- und Sojaproteinen erhalten werden, und unterstützt das Wachstum einer großen Vielfalt von Mikroorganismen, einschließlich anspruchsvoller Aerobier und Anaerobier
• Sojapepton enthält auch natürlichen Zucker, der das Bakterienwachstum fördert
• Natriumchlorid liefert wichtige Elektrolyte für den Transport und das osmotische Gleichgewicht
• Bakteriologischer Agar ist der Verfestiger. Da es keine Kohlenhydrate enthält, ist es sehr nützlich bei der Untersuchung von hämolytischen Reaktionen und auch bei der Herstellung von Schokoladenagar
• Falls gewünscht, können Antibiotika sowie andere Ergänzungen oder Hemmstoffe leicht eingearbeitet werden
• Einige der Mikroorganismen, die auf diesem Medium wachsen, sind die folgenden: Streptococcus, Neisseria, Brucella, Corynebakterien, Listeria, Pasteurella, Vibrio, Haemophilus vaginalis, Candida usw
• Das Europäische Arzneibuch USP empfiehlt dieses Medium in Abschnitt 2.6.12: „ Mikrobiologische Untersuchung nichtsteriler Produkte: Mikrobieller Aufzählungstest “zur Untersuchung von TAMC und TYMC in Produkten
• Die Norm ISO 11133 empfiehlt den Trypticasein-Soja-Agar (TSA) als Referenzmedium
• Für die gesamte aerobe Mikrobenzahl (Eignung der Zählmethode in Gegenwart des Produkts) ? 100 KBE / ml Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa und Bacillus subtilis bei 30-35ºC für ? 3 Tage und für Candida albicans ATCC 10231 und Aspergillus brasiliensis ATCC 16404 inokulieren ? 100 KBE / ml bei 30-35 ºC ? 5 Tage

Für allgemeine Zwecke:

• Untersuchung von TAMC und TYMC in Produkten nach European Pharmacopoeia

Membranfiltration:

• Bereiten Sie die Produktprobe vor, indem Sie das zu untersuchende Produkt in der Trypticasein-Soja-Brühe suspendieren, lösen oder verdünnen
• Übertragen Sie die entsprechende Menge der Probe auf einen Membranfilter
• Legen Sie die Membran auf die Oberfläche von Trypticasein-Soja-Agar (Ref 413819) bei TAMC oder Sabouraud GlucoseAgar (Ref. 413802) bei TYMC
• Inkubieren Sie die Platte mit Trypticasein-Soja-Agar (Ref. 413819) 3-5 Tage bei 30-35 ° C und die Platte mit Sabouraud GlucoseAgar (Ref. 413819) Ref. 413802) bei 20-25 ºC für 5-7 Tagen

Plattenzählmethoden:

• Bereiten Sie die Produktprobe vor, die das zu untersuchende Produkt in der Trypticasein-Soja-Brühe suspendiert, auflöst oder verdünnt
• Inokulieren Sie die Platten mit Trypticasein-Soja-Agar (Ref. 413819) im Falle von TAMC oder Sabouraud GlucoseAgar (Ref. 413802) ) im Falle von TYMC gemäß der Pour-Plate-Methode oder der Surface-Spread-Methode
• Inkubieren Sie die Platten von Trypticasein-Soja-Agar (Ref. 413802) 3-5 Tage bei 30-35 ºC und die Platten von Sabouraud GlucoseAgar (Ref 413802) bei 20-25 ºC für 5-7 Tage
• Wählen Sie die Platten aus, die einer bestimmten Verdünnung entsprechen und die höchste Anzahl von Kolonien mit weniger als 250 (TAMC) oder 50 (TYMC) aufweisen

Qualitätskontrolle:

• Löslichkeit: ohne Rest
• Aussehen: feiens Puder
• Farbe des dehydrierten Mediums: beige
• Farbe des präparierten Mediums: Bernstein / Kirschrot mit Blut
• Finaler pH-Wert (25°C): 7,3 ± 0,2

Mikrobiologische Tests:

Laut Europäischem Arzneibuch

• Gesamtzahl der aeroben Mikroben (TAMC): Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aeruginosa ATCC9027, Bacillus subtilis ATCC 6633, Candida albicans ATCC 10231 und Aspergillus brasiliensis ATCC16404
• Inkubationsbedingungen: (30-35 ºC / <= 3 Tage: Bakterien / <= 5 Tage: Pilze)
• Impfbedingungen: (103-104CFU)

Gemäß ISO 11133

• Inkubationsbedingungen: Bacillus cereus ATCC 11778 (30 ± 1 ° C / 24-48 h) / Bacillus subtilis ATCC 6633 (30 ± 1 ° C / 24-48 h) / Escherichia coli ATCC 8739 (44 ± 1 ° C / 21 ± 3 h) / Escherichia coli O157 H7 ATCC 700728 (37 ± 1 ° C / 21 ± 3 h) / Listeria monocytogenes ATCC 13932 (37 ± 1 ° C / 44 ± 4 h) / Staphylococcus aureus ATCC 25923 (37 ± 1 ° C 24 -48 h) / Escherichia coli ATCC 11775 (36 ± 2 ºC / 20 ± 2 h) / Clostridium perfringens ATCC 13124 (44 ± 1ºC, anaerobe Bedingungen / 21 ± 3 h) / Pseudomonas aeruginosa ATCC 10145 (44 ± 4 h / 36 ± 2 ºC) ) / Enterococcus faecalis ATCC 29212 (36 ± 2 ° C / 44 ± 4 h)
• Impfbedingungen: (100 ± 20. Min. 50 KBE)
• Referenzmedium: Mediencharge TSA bereits validiert. Rest der Stämme: Streptococcus pneumoniaeATCC 6305, Streptococcus pyogenesATCC 19615
• Inkubationsbedingungen: (30-35ºC / 18-24 h)
• Referenzmedium: Mediencharge TSA bereits validiert

Mikroorganismen:

• Pseudomonas aeruginosa ATCC 10145 gutes Wachstum > 70%
• Candida albicans ATCC 10231 gutes Wachstum
• Escherichia coli ATCC 11775 gutes Wachstum > 70%
• Bacillus cereus ATCC 11778 gutes Wachstum > 70%
• Clostridium perfringens ATCC 13124 gutes Wachstum > 70%
• Listeria monocytogenes 4b ATCC 13932 gutes Wachstum 70%
• Aspergillus brasiliensis ATCC 16404 gutesWachstum
• Streptococcus pyogenes ATCC 19615 gutes Wachstum beta-Hämolyse
• Staphylococcus aureus ATCC 25923 gutes Wachstum > 70% beta-Hämolyse
• Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 gutes Wachstum Alpha Hämolyse
• Staphylococcus aureus ATCC 6538 gutes Wachstum
• Bacillus subtilis ATCC 6633 gutes Wachstum > 70%
• Escherichia coli O157:H7 ATCC 700728 gutes Wachstum > 70%
• Escherichia coli ATCC 8739 gutes Wachstum > 70%
• Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 gutes Wachstum