| Bezeichnung: | LBP (Lipopolysaccharide binding protein) ist ein 58-kD Akutphasen Glycoprotein und bindet mit hoher Affinität an den Lipid A Teil des Lipopolysaccharids (LPS) und katalysiert die CD14 und TLR4 abhängige zelluläre Aktivierung durch LPS. LBP interagiert mit CD14, TLR2, TLR4 und dem co-Rezeptor MD-2. Menge 10µg, lyophilisiertLBP-Gehalt 0,25mg/ml PBS, pH 7.2 (bestimmt mittels Human-LBP-ELISA mit definierten Standards), Rekonstituiert wird jedes Röhrchen mit 40µl WasserCharakteristik Das huLBP wird von human-LBP transfizierten CHO-Zellen ins serumfreie Kulturmedium sezerniert. Vor der Transfektion wurde die komplette humane LBP-cDNA durch PCR amplifiziert und in den Expressionsvector p-POL-DHFR kloniert.Reinigung durch His-tag über Metallaffinitätschromatografie, Talon (Clontech) und kontrolliert durch SDS pageAchtung: Der His-tag am C-terminalen Ende des LBP hat keine Proteasebindungsstelle und ist nicht abzuspalten (90-95% Reinheit)Besonderheit: Bis zu 0,2 µg/ml huLBP vermitteln Bindung von FITC-LPS (0.5µg/ml) an CD14+CHO Transfektanten (2 x 106/ml) (FACS).Endotoxingehalt < 0,01 ng/ml nach Erhitzen 5', 75°C (LAL-test, Chromogenix)Lagerung: Langzeit 80°C, kurze Zeit möglich bei 4°C oder -20°CAchtung!! LBP präzipitiert bei raschem Wechsel von Temperatur bzw. pH-Wert.... Die beste Arbeitstemperatur ist im EisbadReferences: Grunwald, U., X. Fan, R. S. Jack, G. Workalemahu, A. Kallis, F. Stelter, C. Schütt, 1996 Monocytes can phagozytose Gram-negative bacteria by a CD14 –dependent mechanism. J. Immunol. 157: 41 |
