DNA Isolationskit
HS-Nr.: 38220000
Lagerung: 2 bis 8°C
- • Easy-to-use Kit für 150 - 300 Isolierungen
- • Isolierung von Plasmid-DNA aus Mini-Preps
- • Extraktion von DNA aus Agarose-Gelen
- • Konzentration von DNA ohne Ethanol-Fällung
Hinweis:
Der DNA-Isolierungskit besteht aus drei Komponenten: einer Glaspulver-Suspension, einer Natriumiodid-Lösung (6 M) und einem Waschlösungskonzentrat. Das Reinigungsprinzip beruht auf der Bindung der Nukleinsäure an die Glaspartikel (Silika-Batch-Verfahren). Fragmente mit einer Größe von über 300 Basenpaaren werden mit einer Effizienz von über 80% isoliert. Mit abnehmender Fragmentgröße nimmt auch die Effizienz ab. Es wird empfohlen den Kit für Fragmente größer als 100 Basenpaare einzusetzen. Isolierung von DNA-Fragmenten aus Agarose-Gelen: Die DNA-Bande von Interesse wird aus dem Agarose-Gel möglichst genau ausgeschnitten und in der Natriumiodid-Lösung bei 55°C geschmolzen. Zur geschmolzenen Agarose wird Glaspulver-Suspension zugegeben und 5 Minuten inkubiert. Danach werden die Glaspartikel durch kurze Zentrifugation pelletiert und dreimal mit Waschpuffer gewaschen. Die DNA wird mit Wasser oder TE-Puffer von den Glaspartikeln eluiert. Ein ausführliches Anwendungsprotokoll wird mitgeliefert. Isolierung von Plasmid-DNA aus Übernacht-Kulturen: Ungefähr 1,5 ml einer Übernachtkultur transformierter Bakterien werden entsprechend dem Protokoll der alkalischen Lyse (Lösungen I-III) behandelt. Der DNA-haltige Überstand nach Lösung III wird in ein neues Reaktionsgefäß transferriert und das 3fache Volumen an Natriumiodid-Lösung zugegeben und gut gemischt. Zu dieser Mischung werden 10 ?l Glaspartikel-Suspension zugegeben und 5 Minuten bei Raumtemperatur inkubiert. Danach wird wie bei der Isolierung von DNA-Fragmenten aus Agarose verfahren. Ein ausführliches Anwendungsprotokoll wird mitgeliefert.
